多重抗原肽(Multiple-Antigen peptide, MAP)是生產(chǎn)高效價(jià)的抗多肽抗體和多肽疫苗的一種有效方法。多重抗原肽以賴氨酸的a-或e-氨基做為連接點(diǎn),形成主鏈,每個(gè)氨基可連接一條多肽。在免疫研究中,MAPs被用來(lái)生產(chǎn)抗體。MAPs具有多肽抗原對(duì)核心分子的高分子比例,且不需要跟載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián)來(lái)刺激抗體應(yīng)答。一些天然多肽本身的免疫應(yīng)答能力比較弱。但是,讓這些多肽以分支的形式存在,當(dāng)多肽被注射倒動(dòng)物體內(nèi)的時(shí)候,可以顯著的增加其免疫應(yīng)答能力。
通常,抗原的大小要求≥10,000 Da。此外,對(duì)于序列中含有>20個(gè)氨基酸的多肽,推薦使用4-分支的MAPs,對(duì)于序列中含有≤15個(gè)氨基酸的多肽,推薦使用8-分支的MAPs。
MAPs可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的固相多肽合成法(SPPS)來(lái)合成。這個(gè)流程包括將Fmoc-Lys(Fmoc)-OH縮合到樹(shù)脂上,F(xiàn)moc脫保護(hù)處理,縮合,已經(jīng)重復(fù)脫保護(hù),偶聯(lián)這些步驟。
在自然界中,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有分支的多肽或者蛋白。但是,MAPs多肽的合成有時(shí)候會(huì)遇到一些問(wèn)題。每個(gè)分支多肽之間很近的空間距離有可能導(dǎo)致多肽之間的聚集,這個(gè)有可能會(huì)導(dǎo)致多肽縮合效率降低。鴻肽生物在MAPs合成方面具有豐富的經(jīng)驗(yàn),可以提供從2-分支到8-分支的MPAs多肽。同時(shí),我們還可以為您的科研活動(dòng)提供不對(duì)稱分支多肽。
MAPs和載體蛋白偶聯(lián)多肽對(duì)比
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四條或者八條多肽被連接到賴氨酸的側(cè)鏈,所以MAPs類似于大蛋白。
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MAP多肽可以跟佐劑一起直接被注射來(lái)產(chǎn)生抗體,不需要載體蛋白。
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MAP合成技術(shù)因?yàn)槭峭ㄟ^(guò)C端連接的,所以更偏愛(ài)N-端或者內(nèi)部多肽;相反KLH-偶聯(lián)技術(shù)偏愛(ài)C-端多肽,然而,KLH載體可能會(huì)引起空間位阻。
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因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)原因,MAP多肽可能在效價(jià)上比KLH偶聯(lián)多肽要稍微高一些。MAP多肽將抗原濃縮度最大化了,最后得到的抗原含量可能占到最終產(chǎn)品中重量的95%。
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MAP多肽在免疫實(shí)驗(yàn)室,每次的用量都可以精確計(jì)算,對(duì)實(shí)驗(yàn)條件具有更高的可控性。